カイネティクス解析～ALP活性の測定

Introduction

薬品や食品など幅広いライフサイエンス分野では、酵素－基質の親和性や酵素活性を調べるために、酵素－基質反応の測定と解析が行われています。V-700 seriesでは、温調可能な特別付属品と[カイネティクス解析]プログラムを組み合わせることで、酵素活性値、Michaelis定数(K_m)、最大速度(V_max)、阻害物質定数の解析、および日本薬局方で定められているカリジノゲナーゼの活性値テーブルを作成することができます。ここでは、代表的な酵素－基質反応を例に、V-700 seriesによる酵素活性の測定・解析方法をご紹介します。

p-ニトロフェニルリン酸に酵素（ALP：アルカリホスファターゼ）を作用させると、無機リン酸とp-ニトロフェノールが遊離します。この遊離したp-ニトロフェノールは、アルカリ性（pH10）で安定な黄色を呈するので、その吸収極大において時間変化測定を行い、基質濃度[S]に対し初速度（傾き）vをプロットし、ALP活性を求めます。