アミノ酸分析 システム紹介 OPAポストカラム誘導体化システム

OPAポストカラム誘導体化システム

Li型/Na型でシステム兼用可能

システムと配管は共通
上図の赤枠の部分を交換する
タンパク質構成アミノ酸分析(Na型)と生体中遊離アミノ酸分析(Li型)は、システム及び配管が共通となっております。移動相、反応液、分離カラム及びアンモニア除去カラムを交換することにより、兼用することが可能です*
*系の変更の際は、流路を十分に洗浄・置換してください。

ポストカラム誘導体化システム (Li-OPA 生体中遊離アミノ酸)

イオン交換カラムを用いて各アミノ酸を分離後、オルトフタルアルデヒド(OPA)で誘導体化し、蛍光検出器で感度良く測定するシステムです。
特徴
  • 生体中遊離アミノ酸(Li型)の分析に対応
  • 低圧グラジエント溶出法により安定したベースラインを実現
  • 1級アミノ酸以外に、プロリンなどの2級アミノ酸も測定可能
  • 生体中遊離アミノ酸を210分で分析(溶出 170 min, コンディショニング 40 min, 1 cycle)
  • 数100 fmolレベルの測定感度
  • 移動相及び反応液の供給に対応
標準試料のクロマトグラム
しじみ抽出液のクロマトグラム
1: p-Ser, 2: Tau, 3: PEA, 4: Asp, 5: Hypro, 6: Thr, 7: Ser, 8: Asn, 9: Glu, 10: Gln, 11: Sarco, 12: Thea, 13: a-AAA, 14: Pro 15: Gly, 16: Ala, 17: Cit, 18: a-AnBA, 19: Val, 20: Cys-Cys, 21: Glc, 22: Cysta, 23: Met, 24: DPA, 25: Ile, 26: Leu, 27: Tyr, 28: Phe, 29: b-Ala, 30: b-AIBA, 31: GABA, 32: allo-Hylys, 33: Hylys, 34: EA, 35: Orn, 36: Lys, 37: Trp, 38: His, 39: 1-Mehis, 40: Ans, 41: Car, 42: 3-Mehis, 43: Arg
試料前処理方法
  1. 試料2.22 g に超純水 8.88 mL を添加した後、ホモジナイズ
  2. 懸濁液 2 mL にアセトニトリルを 2 mL 添加
  3. 3500 rpm, 10 min 遠心分離
  4. 上清を 0.45 µm フィルターでろ過
  5. 0.2 N クエン酸緩衝液 (pH 2.2) で適宜希釈
Li型分離カラム(上)及びLi型アンモニア除去カラム(下)
Li型移動相(右)及びLi型反応液(左)セット
Application Data
流路図
構成
移動相送液ポンプ PU-4185 × 1
オプション DG unit × 1
LG unit × 1
反応液送液ポンプ PU-4185 × 1
オプション R-PU-4185 unit × 1
DG unit × 1
オートサンプラー AS-4050/4150 × 1
オプション TC-4000-1/4000-2 × 1
カラムオーブン CO-4060 × 1
蛍光検出器 FP-4020/25 × 1
ボトルスタンド BS-4000-1 × 1
アンモニア除去カラム AECpak Li-LG
(4.6 mmI.D. x 35 mmL)
× 1
分離カラム AApak Li-LG
(6.0 mmI.D. x 80 mmL, 5 µm)
× 1
移動相(4溶媒)、反応液(2溶媒) Amino Buf & Rea Li-LG 4000 × 1
* 装置制御・データ処理用PC一式が別途必要です。
* バイアル・キャップ等は別売です。

ポストカラム誘導体化システム (Na-OPA タンパク質構成アミノ酸)

イオン交換カラムを用いて各アミノ酸を分離後、オルトフタルアルデヒド(OPA)で誘導体化して蛍光検出器で感度良く測定するシステムです。
特徴
  • タンパク質構成アミノ酸(Na型)の分析に対応
  • 低圧グラジエント溶出法により安定したベースラインを実現
  • 1級アミノ酸以外に、プロリンなどの2級アミノ酸も測定可能
  • タンパク質構成アミノ酸を60分で分析可能(1cycle)
  • 数100 fmolレベルの測定感度
  • 気相加水分解キットを使用することにより、タンパク質およびペプチドのアミノ酸組成を精度良く分析可能
  • 移動相及び反応液の供給に対応
標準試料のクロマトグラム
ミオグロビンの加水分解物のクロマトグラム
1: Cysteic acid, 2: Aspartic acid, 3: Threonine, 4: Serine, 5: Glutamic acid, 6: Proline, 7: Glycine, 8: Alanine 9: Cystine, 10: Valine, 11: Methionine, 12: Isoleucine, 13: Leucine, 14: Tyrosine, 15: Phenylalanine, 16: GABA 17: NH3, 18: Lysine, 19: Histidine, 20: Triptophan, 21: Arginine
Na型分離カラム(上)及びNa型アンモニア除去カラム(下)
気相加水分解キット
Na型移動相(右)及びNa型反応液(左)セット
Application Data
流路図
構成
移動相送液ポンプ PU-4185 × 1
オプション DG unit × 1
LG unit × 1
反応液送液ポンプ PU-4185 × 1
オプション R-PU-4185 unit × 1
DG unit × 1
オートサンプラー AS-4050/4150 × 1
オプション TC-4000-1/4000-2 × 1
カラムオーブン CO-4060 × 1
蛍光検出器 FP-4020/25 × 1
ボトルスタンド BS-4000-1 × 1
アンモニア除去カラム AECpak Na-LG
(4.6 mmI.D. x 35 mmL)
× 1
分離カラム AApak Na-LG
(6.0 mmI.D. x 50 mmL, 5 µm)
× 1
移動相(4溶媒)、反応液(2溶媒) AminoBuffer Reagent Na-LGセット × 1
* 装置制御・データ処理用PC一式が別途必要です。
* バイアル・キャップ等は別売です。