バイオ医薬品をはじめとした新規モダリティによる医薬品の評価・分析

アミロイド凝集は多くの神経変性疾患の発症に関与し、その蓄積は疾患を引き起こす要因の一つと考えられており､アミロイド形成阻害剤の開発に注目が集まっています。 本ポスターでは､CD分光法と正確な二次構造解析BeStSelを組み合わせることで､in vitroでのアミロイド形成阻害剤の効果を非標識・非侵襲で評価する手法を提案します。

本 eBook では、抗体医薬品に関する高次構造評価のソリューションを、高次構造解析・同一性確認・安定性試験・強制分解試験の４つに分けてご紹介しています。

蛋白質である抗体は、熱などの外部刺激による構造変化でその機能が失われます。CD 分光法は、溶液中のタンパク質の熱による高次構造変化を直接評価できます。ここでは JASCO Spectra Manager^TM 2.5 BeStSel を使用して、抗体医薬品の熱による二次構造崩壊のメカニズムを追跡した結果を報告します。

抗体医薬品の多くは 10 mg/mL 以上の高濃度で製剤化されるため、希釈せずに抗体の高次構造の評価を行うことは非常に重要です。ここでは、短光路セルと JASCO Spectra Manager^TM 2.5 BeStSel を組み合わせて、製剤化された抗体医薬品に対して高精度な二次構造解析を実施した結果を報告します。

二重特異性抗体は、２つの標的分子に作用する複雑な構造を有しており、医薬品の開発・製造において高次構造や安定性の評価が重要です。ここでは、CD 分光法を用いて２次・３次構造を評価するとともに、qHOS によるスペクトル差の統計解析や、熱変性・化学変性による安定性解析を行いました。CD 分光法と各種解析プログラムを組み合わせた、二重特異性抗体の多角的な高次構造評価をご紹介します。

DNA アプタマーは、高次構造 (HOS) を形成することでタンパク質などの標的分子に特異的に結合する一本鎖 DNA オリゴヌクレオチドで、バイオセンサーや核酸医薬への応用が進められています。
ここでは、 最大 192 試料の CD スペクトルを自動測定可能な HTCD Plus ハイスループット円二色性測定システムを用い、標的分子への結合に伴う DNA アプタマーの高次構造変化、および DNA アプタマーの標的分子とその類縁体への交差反応性を評価した結果を報告します。

円二色性分散計 (CD) は、水溶液中の核酸の高次構造を低濃度かつ様々な溶媒条件下で評価することができます。ここでは、ハイスループット CD (HTCD) システムと主成分分析 (PCA) を用いて、脳内で凝集すると認知症などの神経変性疾患を引き起こす原因となるα-シヌクレインに特異的に結合する Gquadruplex (G4) アプタマーの三次構造の評価を行ったアプリケーションを紹介します。

円二色性 (CD) 分光法は、熱・pH・添加剤・化学変性剤などの摂動によるタンパク質や核酸の構造変化を追跡できます。
ここでは、メッセンジャー RNA（mRNA）医薬品について、mRNA単独と脂質ナノ粒子（LNP） を用いて粒子化されたmRNAで、高次構造の熱に対する安定性を比較をしました。

アンチセンス核酸や si RNA の薬効の発現には核酸の二本鎖形成が必須であるため、二本鎖の安定性の指標となる変性中点 (Tm) の評価が重要となります。
日本分光は、循環恒温槽不要で 100 °C まで加熱できる空冷式のペルチェセルホルダーと、測定前のアニーリングを自動化した Tm 評価システムを開発しました。このシステムでオリゴ核酸の二本鎖形成の Tm および他の熱力学パラメーターを高精度に算出した結果を紹介します。